把两个菌株在营养液中进行通气培养，细菌与细菌开始接触，形成接合管。每隔一定的时间取样，取得的菌液在搅拌器内搅拌以断开结合管，使配对的细胞分开。然后稀释菌液，防止再度配对。把稀释后的菌液涂布在相关的培养基上，分析Hfr染色体上标记基因进入F-的顺序和时间，绘制出连锁图。
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